微生物所杜文斌团队在微流控高通量筛选塑料解聚酶方面取得新进展----中国科学院微生物研究所
塑料污染是当今世界面临的最重要环境问题之一,塑料污染不仅会破坏生物多样性、加剧气候变化,更危及人类和地球的健康。意在从源头“塑控”减少塑料废弃累积的“禁塑令”也开始在全国全面落地,但对于已暴露在环境中的塑料仍急需高效环保处理方案。微生物降解塑料是最理想最环保的方法,也是近年来的研究重点。目前已发现众多环境和宏基因组分析来源的塑料解聚微生物和酶,后续也利用理性和半理性设计改造以满足在活性和热稳定性等方面需求。但目前降解塑料的微生物和酶种类少、降解效率低,因此亟需进行塑料降解酶的挖掘、改良及应用开发。
中国科学院微生物研究所杜文斌课题组长期致力于推动微流控创新技术的产业化应用,并将微流控技术应用于环境不可培养和极端微生物资源获取、潜在产酶和产活性代谢物功能菌株筛选和评价、复杂微生物群落生态功能和进化研究、以及病原微生物的检测和临床诊断等,相关研究成果发表在Angew. Chem. Int. Ed.、Anal. Chem.、Lab Chip、Environ. Microbiol.、Appl. Environ. Microbiol.、Biosens. Bioelectron.、Small、ACS Appl. Mate. Interf.等杂志。团队最近报道了基于微流控超高通量荧光激活液滴分选平台(Fluorescence-Activated Droplet Sorting,FADS)的塑料解聚微生物单细胞筛选工作。该工作优化了高通量筛选平台性能以及与环境样品筛选的兼容性,筛选通量达1000液滴/秒,分选准确率达到99.95%以上。较传统筛选手段而言,FADS提供了海量微生物和酶突变体单细胞精准筛选的新平台。FADS筛选过程包括三个步骤:单细胞的液滴包裹和孵育、PET模拟底物荧光素二苯甲酸酯(FDBz)的皮升液滴注射,以及反应后单细胞液滴的超高通量筛选。基于上述FADS分选流程,团队成功地从来自PET纺织厂的废水真实样本中获得了10多株PET解聚微生物类群菌株。并从高活性菌株中成功获得了两个可利用工程菌株异源表达的潜在PET降解新酶,并初步验证了菌株和新酶的降解活性。后续团队将致力将FADS筛选技术推广到其他塑料(如PE、PP、PS、PU等)降解菌和新酶的高通量挖掘和改造中,为塑料绿色生物降解和循环利用提供更多新型微生物资源。
上述研究成果(Fluorescence-Activated Droplet Sorting of PET Degrading Microorganisms)于2021年9月30日在线发表于国际主流学术期刊《Journal of Hazardous Materials》(IF: 10.588)(doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127417)。乔雨歆博士为第一作者,中国科学院微生物研究所杜文斌研究员和北京工商大学翁云宣教授为该论文共同通讯作者。该研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金、中国科学院前沿科学重点项目、丹麦诺维信公司(Novozymes A/S)、中国轻工业绿色塑料成型技术与质量评价重点实验室开放课题等项目支持。
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碳氮比的概念和优化方法
碳氮比(C/ N) :严格意义上应是指在微生物培养基中所含的碳源中的碳原子摩尔数与氮源中的氮原子摩尔数之比。(周德庆微生物学教程),在这里,我认为对于既能做碳源又能做氮源的物质应该及计算碳源又计算氮源。很多情况我们简单用培养基的碳源和氮源的比值来替代,但这是不准确的。另外由于一些培养基成分中的碳源不易利用,碳氮比也有用还原性碳源和粗蛋白之间的比值来替代,比如下式碳氮比的计算,就是用葡萄糖中的碳元素的摩尔浓度比上总蛋白中氮元素的摩尔质量浓度。
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染菌与控制是发酵圈永远绕不开的话题。降低染菌率是每一个发酵人应该认真学习和考虑的问题。而合理的应用灭菌、消毒和防腐方法是我们必备的技能。这也是我们在详细介绍发酵过程染菌防控之前需要介绍的内容之一。
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