【发酵基础】P1，P2，P3，千级、万级和十万级，关于微生物实验室的安全和洁净

【发酵基础】P1，P2，P3，千级、万级和十万级，关于微生物实验室的安全和洁净

芦山雪 微生物发酵 今天

1.洁净间

洁净车间，亦称洁净室、无尘车间、无尘室或清净室。是指将一定空间范围内之空气中的微粒子、有害空气、细菌等之污染物排除，并将室内之温度、洁净度、室内压力、气流速度与气流分布、噪音振动及照明、静电控制在某一需求范围内，而所给予特别设计之房间。亦即是不论外在之空气条件如何变化，其室内均能俱有维持原先所设定要求之洁净度、温湿度及压力等性能之特性。

▼洁净度：洁净间的核心指标，洁净度系指空气环境中空气所含尘埃量多少的程度。在一般的情况下，是指单位体积的空气中所含大于等于某一粒径粒子的数量。含尘量高则洁净度低，含尘量低则洁净度高。

▼洁净度的测定 —般可分为三种状态：A、空态指洁净厂房建好后所有设备尚未放入时的洁净室中的洁净度,空态一般不含生产设备的动态工况。B、静态指生产设备机器运转或空转，不带生产状况下的热湿量和产尘量，但无人生产，此肘洁净厂房在各处都应达到相应的洁净度级别。C、动态指生产工况中的状态。生产过程中产品暴露的周围区域应达到规定的洁净度。生产环境的尘埃颗粒数及细菌菌落数的测定方法可参见卫生部监督办公室编写出版的《生产监督检查参考资料》及《洁净室施工验收规范》等文献。

▼洁净等级，洁净等级有国际标准和各个国家的标准。

在我国“洁净厂房设计规范”GB 50073-2002中对洁净室洁净度等级已做出了规定（见下表），这一规定是采用了国际标准ISO14644中的洁净度等级。目前，我国、欧盟、日本、俄罗斯等国的洁净度等级均采用或参照上述国际标准来制订本国或本地区的洁净室洁净度的等级标准。美国也将本国的FS 209E中洁净度等级标准修改为ISO 14644标准。

▼国际标准:(ISO 14644）

注：

①每点至少采样3次。

②本标准不适用表征悬浮粒子的物理、化学、放射及生命性。

③根据工艺要求可确定1~2个粒径。

④根据要求粒径D的粒子最大允许浓度由下式确定（粒径0.1μm~5μm）

 式中: N —为洁净度等级可在1~9级中间以0.1为最小单位递增量插入。

        CN —大于或等于要求粒径的粒子最大允许浓度（PC/m3），以四舍五入至近似的整数，有效位数不超过三位数。

         D —要求的粒径（μm）。

        0.1—常数（μm）。 

▼国内标准

国内标准的百级相当于国际标准的5级。这里的100,1000,10000,十万是指大于0.1μm的粒子数最高限值分别为100,1000,10000，十万/立方米。

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▼不同级别的应用

1 级 这个级别的无尘车间主要用于制造集成电路的微电子工业，对集成电路的精确要求为亚微米。 

10 级 这个级别的无尘车间主要用于带宽小于2微米的半导体工业。

100 级 很多人认为，这一级无尘车间是最常用因而是最重要的无尘车间，人们常常错误地 将 100 级洁净室称为无菌室，以说明“无菌”的或“无尘”的环境要求， 100 级无尘室可用于 医药工业的无菌制造工艺等，这一洁净室大量应用于，植如体内物品的制造，外科手术，包括湖南纯臻净化工程公司 移植手术，集成器的制造，那些对细菌感染特别敏感的病人的隔离治疗，比如像骨髓移植病人 术后的隔离治疗。

1000级 这个级别的无尘车间主要用于高质量光学产品的生产，还用于测试，装配飞机蛇螺仪，装配高质微型轴承等。

10000级 万级无尘车间用于液压设备或气压设备的装配， 某些情况下也用于食品饮料工业， 此外，万级无尘车间在医工业中也很常用。

100000级 十万级无尘车间用于很多的工业部门，比如光学产品的制造，用于较小的元器 件制造大型的电子系统，液压或气压系统的制造，食品饮料的生产，医、药工业也常常使用这 一级无尘车间。

▼GMP车间就属于一类特殊的洁净间

  GMP车间除了对洁净度的要求外，对设备，人员操作，管理都有详细要求。

▼无菌间是另一类特殊的洁净间

我们发酵行业的无菌间对洁净度的要求：一般是指万级的洁净间，超净工作台内能达到100级的洁净度。无菌间更加强调的是无菌，因此我们会辅助于紫外灭菌，酒精灯等消毒和灭菌设备，来实现无菌操作。

2.安全实验室

根据其密封程度的不同，国际上将其分为P1、P2、P3和P4共四个生物安全等级。“P”是英文Protect（保护）的缩写。第四级即P4实验室是生物安全最高等级，可有效阻止传染性病原体释放到环境中，同时为研究人员提供安全保证。

▼一级生物安全实验室

生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。一级生物安全实验室的操作、安全设备和实验设施的设计和建设仅适用于进行基础的教学和研究，处理危害等级1的微生物。BSL-1是生物安全防护的基本水平，依靠标准的微生物操作来保证安全，缺少特殊的一级防护屏障或二级防护屏障。一般来说，一级生物安全实验室仅能从事没有感染性的操作，不能满足食品微生物检测实验室的工作需要 

 ▼二级生物安全实验室

生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。二级生物安全实验室的操作、安全设备和 实验设施的设计和建设适用于临床、诊断、教学，处理危害等级II的微生物。

BSL-2实验室的危险主要是意外的经皮肤或黏膜接触或摄入生物危险物质，需使用生物安全柜进行防护BSL-2实验室有比较齐全的一级屏障，例如个人防护装备，也有废弃物消毒设施等二级屏障来保证安全。对于广大食品微生物检测实验室，一般都要开展沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等危害等级II的致病微生物的检测工作，需要达到二级生物安全实验室的防护水平 。

 ▼三级生物安全实验室

防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。三级生物安全实验室的操作、安全设备和实验设施的设计和建设适用于专门的诊断和研究，处理危害等级III的微生物。BSL-3实验室的危险主要是经皮肤破损处、经口摄入以及吸入感染性气溶胶。BSL-3实验室通过一级和二级防护屏障来保护实验操作人员和实验室周围免受污染。它的二级屏障包括受控的进入通道和经高效过滤器过滤的通风设施。

 ▼四级生物安全实验室

生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。四级生物安全实验室的操作、安全设备和实验设施的设计和建设适用于进行非常危险的外源性生物因子或未知的高度危险的致病因子的操作，操作对象通常是危害等级IV或那些未知的且与危害等级IV的微生物具有相似特点的微生物。BSL-4实验室的危险主要通过黏膜或破损皮肤，通过呼吸道吸入感染性气溶胶。实验室人员通过III级生物安全柜或II级生物安全柜加正压服与感染性气溶胶完全隔离，并且 BSL-4 实验室有复杂的特殊通风装置和废弃物处理系统